即用型

腦組織凍存液

本品是冷凍保存大鼠或小鼠胚胎腦組織用的凍存液。

只要將腦組織放入解凍后的本品中即可實現凍存。

凍存的腦組織在解凍后可通過神經細胞分散溶液（產品編號：291-78001，297-78101）和神經細胞培養基（產品編號：148-09671）進行分散和培養。

◆特點

●　能凍存解剖后的大鼠或小鼠的腦組織。

●　隨時可用

◆凍存數據：大鼠海馬體（胎生19日）

與其他公司的產品相比，在使用本品保存的腦組織中，能獲得多3倍以上的活細胞。

注意事項

請盡量縮短從開始解剖到一次冷凍開始的時間。（請以從進行動物麻醉到將腦組織放入冷凍保存溶液中的時間控制在1小時之內為標準。）從胚胎中取出的細胞存活率隨時間的推移而下降。使用神經細胞分散液能去除死亡細胞，減少得到的細胞總數。冰上操作。

◆實驗方案例子

解剖

1.　麻醉小鼠或大鼠。

2.　用70%乙醇對麻醉動物進行全身（包括胡須和尾巴）消毒。

3.　用不銹鋼盤將動物送入鋪好無塵紙的清潔區。

4.　從妊娠動物中取出胚胎，放入含有L-15溶液的培養皿中。預先將培養皿與L-15溶液的溫度調節到4℃。將盛放胚胎的培養皿至于冰塊上。

4.　※L-15溶液：含有終濃度為0.05 mg/mL硫酸慶da霉素的Leibovitz's L-15培養基

5.　將胚胎轉移到培養皿的蓋子上，并使用顯微鏡快速移除腦組織。

6.　解剖后的腦組織放入另一個裝有L-15溶液的培養皿，再將培養皿放置到冰塊上。

一次冷凍

1.　將從冰箱中取出本品和冷凍用碎冰盒放到清潔區附近。

2.　用鑷子把冷凍的腦組織放入本品中，蓋好試管蓋（放入腦組織前要充分混合保存溶液）。

3.　將試管埋入冷凍用碎冰盒中，試管與冰塊要緊密接觸（試管要埋入試管蓋剛好露出冰面的位置）。

4.　蓋上泡沫箱，靜置90分鐘。

二次冷凍

1.　一次冷凍后，將裝有組織的試管轉移至防凍套管，然后立刻放入超低溫冰箱（-80℃）。（防凍套管要直接放置到冰箱內的底面。）

1.　※為了將裝有組織的試管的溫度變化控制在最小范圍，操作時動作要快速。

1.　※進行這一步操作時，需注意樣品管蓋切勿與保存溶液相接觸。

2.　在超低溫冰箱（-80℃）中靜置3小時。（靜置時間可延長30分鐘左右。但不能少于3小時。）

2.　※期間避免反復開關冰箱門。

保存

1.　二次冷凍后，將裝有組織的樣品管置于凍存架上，然后立刻放入液氮罐中。

1.　※進行這一步操作時，需注意樣品管蓋切勿與管內的保存溶液相接觸。