簡要描述：推薦使用對象● 初次嘗試建立iPS細(xì)胞系的用戶● 需要高效建立細(xì)胞系，但轉(zhuǎn)錄因子不整合到細(xì)胞基因組的用戶● 嘗試了其他方法但不成功的用戶
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
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SRV™ Vector 系列
通過簡單的操作即可建立高質(zhì)量的iPS細(xì)胞系。
推薦使用對象
● 初次嘗試建立iPS細(xì)胞系的用戶
● 需要高效建立細(xì)胞系，但轉(zhuǎn)錄因子不整合到細(xì)胞基因組的用戶
● 嘗試了其他方法但不成功的用戶
SRV™ iPSC Vector的特點(diǎn)
● 在細(xì)胞質(zhì)中也可穩(wěn)定表達(dá)，無需整合進(jìn)宿主細(xì)胞基因組
● SRV™ 載體的密碼子經(jīng)人工修飾優(yōu)化，細(xì)胞毒性低，不容易發(fā)生干擾素誘導(dǎo)
● 重編程iPS細(xì)胞后，可在短時(shí)間內(nèi)消除SRV™
● 人、小鼠等廣泛宿主中的分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均可導(dǎo)入基因
● 在單個(gè)RNA上搭載所有轉(zhuǎn)錄因子，實(shí)現(xiàn)高效重編程
● 通過EGFP可以判斷基因?qū)氲男屎拖臓顩r
● 無需飼養(yǎng)細(xì)胞
● 基因?qū)氩襟E需要BSL2級別實(shí)驗(yàn)室，但后續(xù)過程均可在BSL1級別實(shí)驗(yàn)室處理
什么是隱形RNA載體（SRV™ ）？
根據(jù)產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所（日本）開發(fā)的持續(xù)表達(dá)型仙臺病毒（SeVdp）進(jìn)一步改良而成的載體，在直徑240 nm的類病毒粒子中包封了由人 工核酸組成的一系列RNA轉(zhuǎn)錄基因。 ● 為了避免（病毒成分導(dǎo)致的）干擾素誘導(dǎo)，使用了針對人體細(xì)胞優(yōu)化的人工核酸 ● 編碼區(qū)和非編碼區(qū)經(jīng)過人工修飾，大部分非編碼區(qū)來源于人mRNA ● 僅使用重編程基因表達(dá)所需的最少基因 人體細(xì)胞難以將這種載體識別為異物 |
SRV™ iPSC Vector的種類
SRV™ iPSC-1 Vector : siRNA導(dǎo)入后去除載體
SRV™ iPSC-2 Vector : 伴隨重編程自動去除載體
導(dǎo)入基因表達(dá)的調(diào)節(jié)
隱形RNA載體（SRV™）可以調(diào)節(jié)導(dǎo)入基因的表達(dá)水平。
在SRV™ iPSC Vector 系列中，轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)根據(jù)所使用的細(xì)胞均已調(diào)整到最佳水平。
iPS 細(xì)胞的制備效率＊
※制備效率是本產(chǎn)品在Feeder-free條件下的實(shí)驗(yàn)方案得出的內(nèi)部數(shù)據(jù)。當(dāng)使用其他細(xì)胞作為iPS細(xì)胞誘導(dǎo)的親細(xì)胞時(shí)，應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)方案的適配性。
載體名 | SRV™ iPSC-1 Vector | SRV™ iPSC-2 Vector |
載體去除方法 | siRNA導(dǎo)入后去除載體※ | 自動去除載體 |
重編程基因的表達(dá)水平 | 低水平
| 中水平
|
成纖維細(xì)胞 | 5% | ー |
外周血單核細(xì)胞、含淋巴細(xì)胞的外周血單核細(xì)胞 | ー | 0.05% |
CD34陽性細(xì)胞 | 9% | 17% |
推薦靶細(xì)胞 | 成纖維細(xì)胞 | 外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC） CD34陽性細(xì)胞 |
※請另單獨(dú)購買siRNA產(chǎn)品。
◆SRV™ iPSC-1 Vector
通過導(dǎo)入siRNA來去除載體，適用于成纖維細(xì)胞的重編程
SRV™ iPSC-1 Vector是一款經(jīng)基因表達(dá)水平優(yōu)化的，主要用于成纖維細(xì)胞制備iPS細(xì)胞的產(chǎn)品。它搭載了四種人源重編程基因OCT3/4、KLF4、SOX2、c-MYC 以及EGFP、Puro抗性基因。通過導(dǎo)入siRNA※來去除隱形RNA載體。
※對于使用SRV™ iPSC-1 Vector的實(shí)驗(yàn)，請單獨(dú)購買siRNA。使用SRV™ iPSC-1 Vector的iPS細(xì)胞誘導(dǎo)方案中記載了所需siRNA的序列信息。
iPS細(xì)胞制備流程：使用SRV™ iPSC-1 Vector將成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞的示例
此數(shù)據(jù)為使用細(xì)胞基質(zhì)（iMatrix511）和培養(yǎng)基（StemFit® Basic02N）的內(nèi)部數(shù)據(jù)。如果使用其他基質(zhì)或培養(yǎng)基，請考慮實(shí)驗(yàn)方案的適配性。
◆SRV™ iPSC-2 Vector
伴隨著miR-302的表達(dá)而響應(yīng)并自動去除載體的類型，適用于外周血或臍帶血中含有的單核細(xì)胞的重編程！
SRV™ iPSC-2 Vector是一款經(jīng)基因表達(dá)水平優(yōu)化的，用于外周血單核細(xì)胞（PBMC）和CD34陽性細(xì)胞制備iPS細(xì)胞的產(chǎn)品，它搭載了四種人源重編程基因OCT3/4、KLF4、SOX2、c-MYC 以及EGFP、Puro抗性基因。該隱形RNA載體通過響應(yīng)miR-302 的表達(dá)而自動清除。
iPS細(xì)胞制備流程 : 使用SRV™ iPSC-2 Vector將血細(xì)胞（單核細(xì)胞）誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞的示例
此數(shù)據(jù)為使用細(xì)胞基質(zhì)（iMatrix511）和培養(yǎng)基（StemFit® BasicAK02N）的內(nèi)部數(shù)據(jù)。如果使用其他基質(zhì)或培養(yǎng)基，請考慮實(shí)驗(yàn)方案的適配性。
◆SRV™ control Vector
通過隱形RNA載體確認(rèn)導(dǎo)入的基因在各種細(xì)胞中的活性
SRV™ control Vector 是一種搭載了熒光蛋白EGFP的隱形RNA載體。
可以通過將該載體的基因?qū)氲礁鞣N細(xì)胞來確認(rèn)隱形RNA載體的導(dǎo)入效率。
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SRV™ control Vector基因?qū)際DF細(xì)胞（人成纖維細(xì)胞）的結(jié)果（MOI=3）。 | 隱形RNA載體導(dǎo)入到人軟骨原代培養(yǎng)細(xì)胞中的結(jié)果（MOI=20）。 （與近畿大學(xué)寺村教授的共同研究） |
SRV可以導(dǎo)入到多種細(xì)胞中，而且不論是分裂細(xì)胞還是非分裂細(xì)胞均可高效導(dǎo)入，但請根據(jù)使用的靶細(xì)胞，提前摸索MOI值。
產(chǎn)品編號 | 生產(chǎn)商編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
385-19071 | S1011624P | SRV™ iPSC-1 Vector | 3×106 CIU/tube 以上 |
389-19091 | S1011694P | SRV™ iPSC-2 Vector | 3×106 CIU/tube 以上 |
381-19051 | S0011590P | SRV™ control Vector | 5×106 CIU/tube以上 |
請?jiān)谇懊嫣岬降募墑e或更高級別的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于基因重組實(shí)驗(yàn)，需在BSL2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。
關(guān)于iPS細(xì)胞技術(shù)相關(guān)zhaun利及產(chǎn)品使用的通知 SRV 產(chǎn)品（SRV™ iPSC-1 Vector, SRV™ iPSC-2 Vector）基于iPS Academia Japan公司和Tokiwa-Bio公司簽訂的共享iPS細(xì)胞技術(shù)相關(guān)zhuan利 的協(xié)議進(jìn)行售賣。如果以營利為目的使用SRV開發(fā)和售賣產(chǎn)品等，那么請另行與iPS Academia Japan公司和Tokiwa-Bio公司簽訂技術(shù)相關(guān)的 zhuan利協(xié)議。 如果是非營利組織或以學(xué)術(shù)，教育為目的使用則為非營利目的。 |
※ 本頁面產(chǎn)品僅供研究用，研究以外不可使用。
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